Mise au point d'une technique enzymatique pour doser les IgE seriques spécifiques

Authors: Beaulieu, Lucie
Advisor: Hébert, Jacques
Abstract: Parmi les nombreux radioimmunoessais utilisés pour mesurer des IgE spécifiques, le RAST demeure le plus fréquemment employé en clinique. Sa disponibilité commerciale permet la reproductibilité des valeurs à mesurer. Cette technique est simple et elle est l'outil clinique pour diagnostiquer un sujet allergique. Le RAST révèle, au moyen d'un antisérum anti-IgE marqué radioactivement, les IgE spécifiques qui ont, au préalable, réagi avec les antigènes fixés à une matrice solide. Dans ce système, la présence d'IgG spécifiques peut fausser la mesure des IgE spécifiques parce qu'ils peuvent aussi réagir avec les antigènes fixés. Cette interférence IgG est problématique puisqu'elle nuit à l'étude de la régulation de la synthèse des IgE et l'effet de 1 'immunothérapie sur celle-ci. Le présent travail fait état d'une étude comparative des résultats obtenus avec le REAST et le RAST , un immunoessai commercialement disponible, chez des sujets allergiques et des volontaires normaux. Le REAST et le RAST détectent de façon significative plus d ' IgE spécifiques au phléole chez les sujets allergiques (3,04 + 3,94; 21,65 + 14,50) que chez ceux non-allergiques (0,20 + 0,17; 1,48 + 1,68). Une corrélation significative est calculée entre le REAST et le RAST standard ( r = 0,61 ; p<0,001 ). La spécificité de la mesure des IgE est démontrée en chauffant les sérums avant de procéder au dosage. Ceci a pour effet de diminuer de 85% la valeur de la densité optique. La spécificité antigénique de la mesure des IgE spécifiques est démontrée par compétition entre l'antigène marqué et un antigène libre (non-marqué ) spécifique ou non-spécifique. Seul l'antigène libre spécifique inhibe la fixation du complexe antigène-peroxidase où l'on observe une diminution de la densité optique de plus de 97%. En remplaçant l'anti-IgE polyclonal par un anti-IgE monoclonal, la sensibilité du REAST est accrue.
Reproduction Note: Montréal Trigonix inc. 2018
Document Type: Mémoire de maîtrise
Issue Date: 1986
Open Access Date: 12 February 2019
Permalink: http://hdl.handle.net/20.500.11794/33554
Grantor: Université Laval
Collection:Thèses et mémoires

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