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Publication :
Production et charactérisation des anticorps monoclonaux contre le cytomegalovirus

bul.contributor.advisor-authkeyPatel, Pravin|=n 96063687
bul.contributor.advisor-authkeyLetarte, Robert|=XX5069540
bul.contributor.author-authkeyAl-Halabi, Mohamed Fawaz.|=01-1435580
bul.description.provenancejsnr
bul.identifier.controlNumber1131627683
bul.identifier.lotr20180103
dc.contributor.advisorLetarte, Robert
dc.contributor.advisorPatel, Pravin
dc.contributor.authorAl-Halabi, Mohamed Fawaz
dc.date.accessioned2019-02-12T00:01:56Z
dc.date.available2019-02-12T00:01:56Z
dc.date.issued1986
dc.date.updated2019-02-12T00:01:56Z
dc.description.abstractL'objectif de ce projet a été la production des anticorps monoclonaux dirigés contre le cytomegalovirus (CMV) pour fin d'utilisation potentielle en diagnostic et/ou l'utilisation comme outil pour etudier les aspects fondamentaux du CMV. Des anticorps monoclonaux ont été obtenus par fusion de lymphocytes de souris (immunisées par quatre injections intrapéritonéales de 500 mg à intervale de deux semaines) et des cellules de mylome de souris (NSO) maintenues en culture exponentielle. Le dépistage des clones sécréteurs a été effectué par ELISA et immunofluorescence (IF). Les hybridomes intéressants ont été clonés par dilution limite puis congelés dans l'azote liquide et injectés par voie intrapéritonéale chez des souris (BALB/c), traitées avec une injection intrapéritonéale de 0.7 ml de pristane (2,4,10,14-Tetramethylpentadecane) dix jours auparavant, pour la production de liquide ascitique. Parmi les clones sélectionnés, un seul s'est révélé d'un grand intérêt. Le clone CLB-1 s'est révélé d'une grande reactivité et d'une grande spécificité contre le CMV. Le liquide ascitique produit par les cellules monoclonales CLB-1 a été testé et les aspects suivants des réactions entre le CLB-1 et le CMV ont été vérifiés: (a) Reactivité et spécificité de l'anticorps contre le CMV. Pour étudier ce phénomène, l'anticorps monoclonal (CLB-1) a été testé par IF (en dilution de 1:100) contre des cellules fibroblastiques infectées par le CMV (AD169) ou par l'Herpès simplex type-1 ou type-2. Les résultats ont montré une réaction positive avec les cellules infectées par le CMV (AD169) et négative avec les cellules non-infectées ou infectées par l'Herpès sipmlex type-1 ou type-2. (b) La capacité de cet anticorps (CLB-1) pour la detection des isolées cliniques de CMV a été vérifié. L'anticorps monoclonal a détecté toutes les isolées cliniques trouvés positives au CMV. (c) Pour étudier la cinétique de la synthèse de la protéine contre lequel l'anticorps monoclonal est dirigé, le CLB-1 a été testé en IF avec des cellules fibroblastiques infectées avec le CMV à des temps différents après l'infection. Les résultats ont montré une réaction positive entre 72 et 96 heures après 11 infection prouvant ainsi que la protéine contre laquelle CLB-1 est dirigé est une protéine tardive. (d) La capacité neutralisante de 11 anticorps a été vérifiée et il a été prouvé que ce derniér neutralise le virus à une dilution de 1:100 comparativement au sérum humain ayant une capacité neutralisante à une dilution de 1:5. (e) Finalement le test d'immunodiffusion double sur gel d1 agarose a montré que 1'anticorps monoclonal CLB-1 est de type IgGl. Plusieurs essais ont été effectués afin de déterminer le poids moléculaire de la (les) protéine(s) contre laquelle 11 anticorps CLB-1 est dirigé. Par immunoblotting, il nous a été impossible d1 identifier cette (ces) protéine (s). La raison probable est la destruction ou la modification de 11 épitope dans le processus de préparation de 11 antigene. Il a été mentionné que la majorité des anticorps monoclonaux ne précipitent pas les antigene contre lesquels ils sont dirigés (Carter and Ter Meulen, In advances in virus research. 1984, 29: 95-130). En conclusion nous avons produit un anticorps monoclonal contre le CMV, cet anticorps peut nous aider pour les diagnostic et probablement pour le traitement de 1'infection virale de CMV.fr
dc.description.abstractFusions of spleen cells obtained from mice immunized with human cytomegalovirus (CMV) and a mouse myeloma cell line were performed. One monoclonal antibody, CLB-1 was obtained from the four fusions performed. The following aspects of the reaction of the monocolona1 antibody CLB-1, with CMV were investigated: (a) The reactivity and specificity of CLB-1 with CMV; (b) the ability of the CLB-1 monoclonal antibody to detect clinical isolates of CMV; (c ) the kinetics of synthesis of the protein against which the CLB-1 monoclonal antibody reacts ; (d) the ability of the CLB-1 to neutralize CMV; and (e) some characteristics of this monoclonal antibody. The data obtained showed that the CLB-1 monoclonal antibody detected cells infected with CMV A D16 9 , the strain which was used as the immunizing antigen. The CLB-1 antibody showed a high degree cf specificity for the CMV as it did not react with the herpes simplex type-1, herpes simplex type-2 infected cells nor with uninfected human fibroblasts. From the kinetic experiments, the data obtained showed that this monoclonal antibody was directed against a late protein(s) that appeared between 72h and 96h post-infection. The CLB-1 antibody neutralized the virus completely at a dilution of 1:100 of an acitis fluid preparation. Using the double immunodiffusion method, the CLB-1 antibody was found to belong to the IgGl sub-class of immunoglobulinsen
dc.description.numerisationMontréal Trigonix inc. 2018fr_CA
dc.format.extentxii, 80 f.
dc.identifier.bacTC-QQLA-6968
dc.identifier.other6968
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/20.500.11794/33557
dc.languageeng
dc.rightshttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2
dc.subject.rvmAnticorps monoclonauxfr_CA
dc.subject.rvmCytomégalovirusfr_CA
dc.titleProduction et charactérisation des anticorps monoclonaux contre le cytomegalovirusen
dc.typemémoire de maîtrise
dc.type.legacyCOAR1_1::Texte::Thèse::Mémoire de maîtrisefr
dspace.accessstatus.time2024-03-21 18:19:51
dspace.entity.typePublication
etdms.degree.grantorUniversité Lavalfr_CA
etdms.degree.nameMémoire. Médecine.fr_CA
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