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Personne :
Gaudreault, Manon.

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Gaudreault

Prénom

Manon.

Affiliation

Département d'oto-rhino-laryngologie et d'ophtalmologie, Faculté de médecine, Université Laval

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Résultats de recherche

Voici les éléments 1 - 3 sur 3
  • PublicationAccès libre
    Modulation de l'expression du gène encodant la sous-unité d'intégrine α6 durant la cicatrisation cornéenne
    (2007) Gaudreault, Manon.; Guérin, Sylvain
    Cette thèse de doctorat porte sur l'étude des notions fondamentales de la vision, plus particulièrement de la compréhension de l'homéostasie et de la cicatrisation de la cornée. En fait, l'attention de ces travaux est accordée à la modulation de l'expression d'un récepteur important dans l'adhésion de l'épithélium cornéen : la sous-unité d'intégrine a6. Les intégrines sont des protéines transmembranaires, des composantes essentielles de l'adhésion entre cellules et la matrice extracellulaire. D'ailleurs, les intégrines sont impliquées dans la plupart des processus cellulaires et sont un élément clef de tout tissu, incluant le tissu oculaire. Les intégrines a6(31 et a6|34 sont toutes deux exprimées au niveau de l'épithélium cornéen, deux intégrines ayant comme ligand la laminine. Lors de la cicatrisation cornéenne, l'expression de la laminine ainsi que celle de la sous-unité a6 est favorisée. Cependant, le rôle des intégrines a6(31 et a6(34 ainsi que la modulation de l'expression du gène de la sous-unité a6 au niveau de l'épithélium cornéen demeuraient des éléments obscurs avant le début de ces travaux. L'objectif principal des travaux était donc d'identifier les facteurs importants dans la modulation du promoteur du gène de la sous-unité d'intégrine a6 dans la réponse des cellules épithéliales de l'épithélium cornéen lors de la cicatrisation cornéenne. Ces travaux ont permis de démontrer l'importance des facteurs Spl, Sp3 et NFI dans la régulation de la transcription du gène a6 dans l'homéostasie, ainsi qu'à des étapes précises du processus de la cicatrisation cornéenne. De plus, l'effet global de la laminine dans la réponse des cellules épithéliales de la cornée suite à l'activation des intégrines a6(31 et a6(34 est mieux défini.
  • PublicationAccès libre
    Influence of Sp1/Sp3 expression on corneal epithelial cells proliferation and differentiation properties in reconstructed tissues
    (Association for Research in Vision and Ophthalmology, 2003-04-01) Guérin, Sylvain; Germain, Lucie; Giasson, Marcelle; Gaudreault, Manon.; Leclerc, Steeve; Carrier, Patrick; Larouche, Kathy
    PURPOSE : Primary cultured epithelial cells are widely used for the production of tissue-engineered substitutes and are gaining popularity as a model for gene expression studies. However, as such cells are passaged in culture, they often lose their ability to proliferate by progressing toward terminal cell differentiation, a process likely to be determined by altered expression of transcription factors that have functions critical for cell adhesion and differentiation. This study was designed to determine whether the variable life span of primary cultured human corneal epithelial cells (HCECs) might be the consequence of varying expression levels of the well-known transcription factors Sp1 and Sp3 (Sp1/Sp3). METHODS : HCECs were obtained from donor eyes and cultured on irradiated Swiss-3T3. Sp1/Sp3 expression was monitored by Western blot and electrophoretic mobility shift assay (EMSA). The Sp1/Sp3 regulatory influence was evaluated by transfection of HCECs with a recombinant plasmid bearing the Sp1/Sp3-dependent poly(ADP-ribose) polymerase (rPARP) promoter fused to the CAT reporter gene. HCECs that expressed various levels of Sp1/Sp3 were also used for the production of corneal substitutes. RESULTS : Expression of Sp1/Sp3 was dramatically inconsistent between HCECs isolated from the eyes of different donors. Both factors were highly expressed during one passage and then totally disappeared as cells terminally differentiated. Proper stratification of HCECs on reconstructed tissue substitutes could be obtained only with cells that also had a delayed peak of Sp1/Sp3 expression when cultured in vitro. CONCLUSIONS : Expression of Sp1/Sp3 may represent a good predictor for selecting HCECs that are most likely to proliferate, stratify, and differentiate properly when used for the production of reconstructed corneal substitutes.
  • PublicationAccès libre
    Transcriptional regulation of the human α6 integrin gene by the transcription factor NFI during corneal wound healing
    (Association for Research in Vision and Ophthalmology, 2008-09-01) Guérin, Sylvain; Germain, Lucie; Gingras, Marie-Ève; Gaudreault, Manon.; Leclerc, Steeve; Vigneault, François; Carrier, Patrick
    Purpose. Wound healing of the corneal epithelium is highly influenced by regulation of integrin gene expression. A recent study demonstrated that laminin (LM), a major constituent of the extracellular matrix (ECM), reduces expression of the human α6 integrin subunit gene by altering the properties of the transcription factor (TF) Sp1. In this work, a target site was identified for the TF nuclear factor I (NFI) on the human α6 gene, and its regulatory influence was characterized in corneal epithelial cells. Methods. Plasmids bearing the α6 promoter fused to the CAT gene were transfected into human (HCECs) and rabbit (RCECs) corneal epithelial cells grown on LM. The DNA-binding site for NFI in the α6 promoter was identified by DNase I footprinting. Expression and DNA binding of NFI was monitored by Western blot, RT-PCR, and electrophoretic mobility shift assays (EMSAs), and its function was investigated through RNAi and NFI overexpression assays. Results. All NFI isoforms were found to be expressed in HCECs and RCECs. Transfection analyses revealed that NFI is a repressor of α6 expression in both types of cells. LM increases expression of NFI, whereas inhibition of each NFI isoform increases promoter activity suggesting that NFI is a key repressor of α6 transcription. In addition, the negative influence of NFI appears to be potentiated by the degradation of Sp1 when cells are grown on LM. Conclusions. Repression of α6 expression therefore contributes to the final steps of corneal wound healing by both reducing proliferation and allowing attachment of the epithelium to the basal membrane.